老哥俱乐部

细胞简介
：

小鼠淋巴结淋巴分离自淋巴结；淋巴结是哺乳类的周围淋巴器官，由淋巴细胞集合而成。呈豆形，位于淋巴管行进途中
，是产生免疫应答的重要器官之一
。淋巴结表面包有被膜，被膜的结缔组织伸入淋巴结内形成小梁
，构成淋巴结的支架。被膜下为皮质区，淋巴结的中心及门部为髓质区。皮质区有淋巴小结
、弥散淋巴组织和皮质淋巴窦（简称皮窦），髓质包括由致密淋巴组织构成的髓索和髓质淋巴窦（简称髓窦）。淋巴窦的窦腔内有许多淋巴细胞和巨噬细胞
，从输入淋巴管流来的淋巴液先进入皮窦再流向髓窦，后经输出淋巴管离开淋巴结。淋巴结的主要功能是滤过淋巴液，产生淋巴细胞和浆细胞，参与机体的免疫反应。淋巴结肿大或疼痛常表示其属区范围内的器官有炎症或其他病变。主要功能是滤过淋巴液，产生淋巴细胞和浆细胞，参与机体的免疫反应；当局部感染时，细菌、病毒或癌细胞等可沿淋巴管侵入
，引起局部淋巴结肿大。如该淋巴结不能阻止和消灭它们，则病变可沿淋巴管的流注方向扩散和转移
。淋巴结淋巴细胞是白细胞的一种
，由次级淋巴器官淋巴结产生，是机体免疫应答功能的重要细胞成分
；细胞为圆形细胞核
，细胞质少。成熟淋巴细胞需依赖抗原刺激而分化增殖，继而发挥其免疫功能。

方法简介：

公司实验室分离的小鼠淋巴结淋巴采用分离淋巴结组织
、研磨获取单细胞悬液后通过密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为1×10?cells/瓶
。

质量检测

公司实验室分离的小鼠淋巴结淋巴经过检测，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体
、细菌、酵母和真菌等
。

培养信息：

培养基 含FBS
、生长添加剂、Penicillin
、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 悬浮

细胞形态 圆形

传代特性 不增殖
；不传代

消化液 0.25%

培养条件 气相
：空气

，95%；CO2
，5%

实验报告：

一
、分离与培养：

1

、无菌条件下
，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次
，将组织剪成1mm3左右大小；

2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min

，之后用滴管吹打制成单细胞悬液
，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置
；

3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液
，混悬10s，置37℃消化10 min后
，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织被消化；

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液
，1200r/min 离心10min，弃去上清
，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶

，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；

5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；二、免疫荧光鉴定：

1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min

，然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min

；

2、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min
；

3、PBS冲洗细胞2次，每次10min
，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；

4
、按1: 100的比例稀释α-actin一抗
，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；

5
、PBS冲洗细胞3次，每次10min


，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗
， 37℃条件下放置1h；

6
、用PBS冲洗3次
，每次10min，在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

公司正在出售的产品：

大鼠α1抗前体(pre-α1-AT)检测试剂盒

，英文名： pre-α1-AT ELISA Kit

Mouse protein phosphatase (PP) ELISA Kit 小鼠蛋酸酶(PP)检测试剂盒

ELISA 小鼠血清淀粉样蛋白(mouse SAA)  进口分装

CLIAKitforIGFBP2(Humaninsulin-likegrowthfactorsbindingprotein2)ELISAKit人胰岛素样生长因子结合蛋白2

通用型牛轮状病毒(ROTO)试剂盒20次

ELISAKitCyclin-D2大鼠细胞周期素D2

HA重组甲型流感 H1N2 (A/swine/Guangxi/13/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin 0.1mgShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln9) 海葵神经毒素(35肽)

IL22RA2重组人 IL22BP / IL22RA2 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

CTF1 Protein Human 重组人 Cardiotrophin-1 / CTF1 蛋白

LAYN Protein Human 重组人 Layilin / LAYN 蛋白 (Fc 标签)

ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin 0.1mgShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln9) 海葵神经毒素(35肽)

CTF1 Protein Human 重组人 Cardiotrophin-1 / CTF1 蛋白

HA重组甲型流感 H1N2 (A/swine/Guangxi/13/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

LAYN Protein Human 重组人 Layilin / LAYN 蛋白 (Fc 标签)

IL22RA2重组人 IL22BP / IL22RA2 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat thyroglobulin (TG) ELISA Kit 大鼠甲状腺球蛋白(TG)检测试剂盒

HumanNeurokininsB,NKBELISAKit 人神经B(NKB)检测试剂盒 96T/48T 进口分装

Human3-Niotyrosine,3-检测试剂盒人3-硝基酪(3-)检测试剂盒规格

：96T/48T

真菌/酵母总巯基含量比色法定量检测试剂盒20次

Mouseai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISAKit小鼠抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)检测试剂盒规格：96T/48T

小鼠淋巴结淋巴细胞小鼠抗透明带抗体(aZP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠Qa淋巴细胞抗原2(Qa-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

注意事项
：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和老哥俱乐部联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态
、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等，确保细胞培养条件一致
，若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题，责任由客户自行承担。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题，部分细胞由于温度变化及剧烈碰亡破碎形成碎片
，是正常现象。观察好细胞状态后
，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置4-6h。

4. 贴壁细胞可以消化
，悬浮细胞直接混匀收集细胞

，900 rpm-1000 rpm离心3 min，弃上清
。加5 mL PBS重悬细胞，再900 rpm-1000 rpm离心3 min，，用新鲜的*培养基重悬细胞，并接种到新的培养瓶或培养皿中
，置于培养箱中进行培养
。

5. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。

6. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态
，便于和我司技术部沟通交流。由于运输的原因，个别敏感细胞会出现不稳定的情况，请及时和老哥俱乐部联系，告知细胞的具体情况
，以便老哥俱乐部的技术人员跟踪回访直至问题解决。

7. 该细胞仅供科研使用。

8. 备注：运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞
，请换用按照说明书细胞培养条件新配制的*培养基来培养细胞
。收到细胞后次传代建议1
：2传代 。

9.注意
： 1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿


。不是1个T25瓶传2个10cm皿。